fa کاهش بیان نسبی ژن های مرتبط با آپوپتوسیز در سلول گرانولوزا با افزودن استرادیول تخصصي Special پژوهشي Research <p>&nbsp;<strong> هدف از پژوهش حاضر بررسی اثرات آپوپتوتیک افزایش تراکم سلول‌های گرانولوزا و افزایش استرادیول بر بیان نسبی ژن&shy;های مرتبط با آپوپتوسیز ( </strong><strong>Bcl-2 </strong><strong>، </strong><strong>Bax </strong><strong>و </strong><strong>GADD45&beta; </strong><strong>) و چرخه سلول ( </strong><strong>CCDN-2 </strong><strong>) بود. به همین منظور بعد از جمع&shy;آوری تخمدان گاوها از کشتارگاه، سلول‌های گرانولوزای فولیکول&shy;های 4 تا 8 میلی&shy;متری جداسازی شدند. سپس تعداد سلول&shy;های زنده شمارش شده و نمونه سلول‌های گرانولوزا برای شش روز کشت داده شدند. تیمارها شامل </strong><strong>1) 500 هزار سلول در 1000 میلی&shy;لیتر مایع کشت (کنترل)، 2) 500 هزار سلول در 500 میلی&shy;لیتر مایع کشت (گروه آپوپتوتیک: افزایش تراکم دلیل آپوپتوتیک بودن است) و 3) 500 هزار سلول در 500 میلی&shy;لیتر مایع کشت و افزودن استرادیول از روز دوم کشت (گروه آپوپتوتیک + استرادیول) بودند. همچنین، بیان ژن‌های مرتبط با آپوپتوسیز و چرخه سلولی و غلظت استرادیول نمونه&shy;ها بررسی شد. نتایج نشان داد بیان نسبی ژن‌های </strong><strong>Bax </strong><strong>و </strong><strong>GADD45&beta; </strong><strong>در گروه آپوپتوتیک نسبت به دو گروه دیگر بیشینه بود، ولی با افزودن استرادیول بیان نسبی آنها کاهش یافت و به سطح کنترل بازگشت. نسبت </strong><strong>Bcl-2 </strong><strong>به </strong><strong>Bax </strong><strong>در گروه آپوپتوتیک نسبت به دو گروه دیگر کاهش یافت، در حالی که با افزودن استرادیول این نسبت به طور معنی&shy;داری افزایش نشان داد ولی همچنان مقدار آن نسبت به گروه کنترل کمتر بود. بیان نسبی ژن </strong><strong>CCDN-2 </strong><strong>در گروه آپوپتوتیک نسبت به دو گروه دیگر کمینه بود ولی اختلاف معنی&shy;داری بین گروه استرادیول و گروه کنترل دیده نشد. به طور کلی نتایج پژوهش حاضر نشان داد استرادیول می&shy;تواند سلول‌های گرانولوزا را در برابر آپوتوزیس ناشی از افزایش تراکم محافظت کند و این کار را ممکن است از راه افزایش سرعت چرخه سلولی گامه </strong><strong>G₁ </strong><strong>به </strong><strong>S </strong><strong>انجام &shy;دهد. </strong></p> The objective of this study was to evaluate the apoptotic effects of increasing granulosa cell density and increasing estradiol on relative gene expression associated with apoptosis factors (Bcl-2, Bax and GADD45&beta;) and cell cycle (CCDN-2). For this reason after collecting ovaries of cows from an abattoir, granulosa cells were separated from 4- to 8-mm follicles. Then, viable cells were counted and granulosa cell samples were cultured for 6 days. Treatments were included 1) 500,000 cell/1000 ml liquid culture (Control), 2) 500,000 cell/500 ml liquid culture (apoptotic group: increasing cell density cause apoptosis), 3) 500,000 cell/500 ml liquid culture and estradiol from day two of culture (apoptotic group+estradiol). Also, expression of genes associated with apoptosis factors and cell cycle, and estradiol of samples were evaluated. Results showed relative gene expression of Bax and GADD45&beta; was greatest in apoptotic group compared to two other groups but, with adding estradiol expression of these two genes decreased to control level. Bcl-2/Bax ratio decreased in apoptotic group compared with two other groups while, adding estradiol significantly increased this ration, but, still it was lower than control group. Relative gene expression of CCDN-2 was lowest in apoptotic group compared to two other groups but, no significant difference was observed between control and estradiol group. Overall results of the present study showed that estradiol can protect granulosa cells against apoptosis induced with increasing in cell density and probably it was done through progression of the cell cycle from G1 to S stage. سلول گرانولوزا, استرادیول, آپوپتوسیز Granulosa cell, Estradiol, Apoptosis 113 121 http://rap.sanru.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-88&slc_lang=fa&sid=1 Essa Dirandeh عیسی دیرنده 100319475328460010163 100319475328460010163 Yes Sari Agricultural Sciences and Natural Resources University دانشگاه علوم کشاوزی و منابع طبیعی ساری Zarbakht Ansari Pirsaraei زربخت انصاری پیرسرائی 100319475328460010164 100319475328460010164 No Sari Agricultural Sciences and Natural Resources University دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری Reza Masoomi رضا معصومی 100319475328460010165 100319475328460010165 No University of Zanjan دانشگاه زنجان