fa امکان تعیین جنسیت با استفاده از DNA آزاد شناور جنینی در پلاسمای خون بز آبستن ژنتیک و اصلاح نژاد دام ژنتیک و اصلاح نژاد دام پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">چکیده مبسوط</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;"></span></span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مقدمه و هدف</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">:</span></span></span></strong><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp; امروزه، در پرورش حیوانات اهلی از جمله بز و گوسفند، دستیابی به روشی دقیق، آسان و مقرون به صرفه، پیش‌انتخاب جنسیت جنین، دارای اهمیت اقتصادی خاصی می</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">باشد. اخیراً، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">ی آزاد جنینی شناور در پلاسمای خون، بعنوان کاندیدای مناسبی برای روش تعیین جنسیت&nbsp;</span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">غیر تهاجمی در دام&shy; ها و گونه</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">های حیات وحش در خطر انقراض، معرفی شده است. بدین منظور، هدف از پژوهش حاضر، تعیین جنسیت جنین بز به کمک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">ی آزاد جنینی شناور در پلاسمای خون بزهای آبستن بود</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">.</span></span></span><br> <strong><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش‌ها:</span></span></strong><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> در این راستا، در مجموع، تعداد 21 حیوان آزمایشی شامل 17 بز ماده که دوره‌ی آبستنی بعد شش هفتگی را تجربه می‌کردند، 2 بز غیرآبستن و 2 بز نر (کنترل منفی) انتخاب شدند. در ادامه تحقیق، بزهای ماده با استفاده از روش سیدرگذاری در واژن، همزمان‌سازی فحلی انجام و سپس در معرض جفت گیری طبیعی قرار گرفتند. عدم بازگشت به فحلی مجدد به</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">عنوان شاخص موفقیت در آبستنی تلقی شد. همچنین در ماه&shy; های آخر از روش سونوگرافی برای تایید ابستنی استفاده شد. متعاقباً، پس از جداسازی پلاسمای خون بز ماده، استخراج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">cffDNA</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> با استفاده از دستورالعمل</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">های آزمایشی متداول موجود صورت گرفت. آغازگرهای این پژوهش بر اساس ژن آمیلوژنین، مستقر در کروموزوم </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">X</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">Y</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">، طراحی شد. واکنش زنجیره‌ای پلی مراز با استفاده از روش‌های استاندارد موجود بهینه‌سازی شد. </span></span><br> <strong><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته‌ها:</span></span></strong><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp; نتایج مولکولی حاصله، وجود دو باند در جنین نر (باند ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">AMELX</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> با اندازه‌ی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">bp </span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">۱۷۱ و باند ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">AMELY</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> با اندازه‌ی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">bp </span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">۱۱۱) و یک باند در جنین ماده (باند ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">AMELX</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> با اندازه‌ی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">bp </span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">۱۷۱) را نشان داد. همچنین بزهای آبستن در اواخر دوره‌ی آبستنی غلظت </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> جنینی بالاتری را نسبت به دوره‌های قبلی نشان دادند. </span></span><br> <strong><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری:</span></span></strong><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> با مقایسه‌ی نتایج تعیین جنسیت مولکولی پیش از تولد جنین‌های تحت آزمایش، با نتایج عملی پس از تولد، دقت تعیین جنسیت با استفاده از ژن آمیلوژنین، حساسیت، ویژگی و صحت، 0/83، 0/93 و 0/93 به دست آمد. شاید با کاربری تکنیک حاضر، بتوان در بررسی‌های مدیریتی تخمین بز جایگزین در گله (سیستم پرورش داشتی) و یا کنترل فروش بزهای آبستن مازاد، یا پیش‌بینی تعداد بزهای نر در زایش آتی (سیستم پرواربندی) استفاده کرد.</span></span><span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></div> &nbsp;<br> <span style="font-family:2 Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span> <div style="text-align: justify;"><strong>Extended Abstract</strong><br> <strong>Introduction and Objective:</strong> To date, sex determination technique in domestic animal has economic benefits. Recently, circulating free DNA (cfDNA) highlighted as suitable candidate for non-invasive sex determination in livestock and endangered wild life animals. Based on this motivation, the objective of this report was the potential usefulness of free fetal DNA in maternal blood for prenatal fetal gender determination in pregnant goats.<br> <strong>Material and Methods:</strong> &nbsp;In this respect, a total of 21 animals, including 17 pregnant females with a gestation period of six weeks, unborn goats and 2 males (negative controls) were selected. During the running experiment, estrous synchronization&nbsp; was performed by intravaginal CIDR. The animals not returned to estrus was considered as an indicator of success in pregnancy. Also in the last months, ultrasound method was used to confirm pregnancy. In the next phase, cffDNA was extracted from the blood plasma of female goats using the available common experimental protocol. The primers in this experiment were designed based on AME gene located on X and Y chromosomes. The polymerase chain reaction was optimized based on available standard methods.<br> <strong>Results:</strong> The observation addressed existence of two fragment in the male embryo (171 bp AMELX gene band and 111 bp AMELY gene band) and one fragment in the female embryo (171 bp AMELX gene band). Here, most of findings was in line of similar pervious literatures and sex determination based on AME gene in case of sensitivity, specificity and accuracy indices indicated 0.83, 0.93 and 0.93 respectively.<br> <strong>Conclusion:</strong> On this basis, the results opened a new horizon of the potential usefulness of free fetal DNA in maternal blood for prenatal fetal gender determination in pregnant goats.</div> &nbsp; بز, تعیین جنسیت, آمیلوژنین و cffDNA AMEL, cfDNA, Goat, Sex determination also in the last months, ultrasound method was used to confirm pregnancy 156 163 http://rap.sanru.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-733-4&slc_lang=fa&sid=1 Majid Rahimi مجید رحیمی majidr1412@gmail.com 100319475328460017140 100319475328460017140 No Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, University of Tabriz گروه علوم دامی، دانشگاه تبریز، تبریز، ایران Arash Javanmard آرش جوانمرد arash_707@yahoo.com 100319475328460017141 100319475328460017141 Yes Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, University of Tabriz گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز Abbas Rafat عباس رافت abbasrafat@hotmail.com 100319475328460017142 100319475328460017142 No Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, University of Tabriz گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز karim hasanpur کریم حسن پور karimhasanpur@yahoo.com 100319475328460017143 100319475328460017143 No Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, University of Tabriz گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز