Research on Animal Production
پژوهشهاي توليدات دامي
rap
Agriculture
http://rap.sanru.ac.ir
1
admin
2251-8622
2676-461X
8
10.61186/rap
14
8888
13
fa
jalali
1396
8
1
gregorian
2017
11
1
8
16
online
1
fulltext
fa
استخراج DNA از ریشه مو با روش نمکی بهینه یافته
DNA Extraction from Hair Roots using Modified Salting out Method
تخصصي
Special
پژوهشي
Research
<strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">کیفیت و کمیت </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman bold,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> استخراج شده بر نتایج مطالعات ژنتیک مولکولی از جمله واکنش زنجیره­ای پلیمراز (</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman bold,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">PCR</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">)، هضم آنزیمی و غیره تأثیر بسزایی دارد. بعلاوه در انتخاب نوع بافت جهت انجام پژوهش های ژنومیک علاوه بر کیفیت و کمیت </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman bold,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> استخراج شده، راحت بودن جمع­ آوری نمونه، هزینه ­های حمل و نقل، ایمن بودن نمونه ­برداری و پیش فرآوری نمونه­ها بایستی مد نظر قرار گیرد. در این مطالعه روش کارآمد استخراج نمکی بهینه یافته از بافت<br>
ریشه ­ی مو که مقادیر بالای </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman bold,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> با کمیت وکیفیت مناسب را فراهم می­آورد، معرفی می ­گردد. در این آزمایش جهت استخراج </span></span></strong> <strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman bold,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">از</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> 400 نمونه­ی مو و 40 نمونه ­ی خون گاومیش استفاده شد. کمیت و کیفیت </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman bold,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> استخراج شده از هر دو بافت با استفاده از نسبت جذب نوری (260-280 </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman bold,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">OD</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">) و ژل آگارز 2/1% و واکنش زنجیره­ای پلیمراز (</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman bold,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">PCR</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">)، ارزیابی شد. میانگین میزان و خلوص </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman bold,serif;"><span style="font-size:8.0pt;">DNA</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:2 mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> استخراج شده از مو به­ترتیب 12/28 میکروگرم و 87/1 بود. این مقادیر برای خون 86/17 میکروگرم و 83/1 گزارش شد. نتایج ارائه شده در مطالعه­ ی حاضر و مقایسه­ ی آن با مطالعات قبلی نشان داد که روش ساده و بهینه­ ی ارائه شده در این بررسی یک روش اقتصادی، راحت، ایمن، کارآمد بوده و قابل توصیه به آزمایشگاه ­های بیوتکنولوژی است.</span></span></strong>
The reliability and performance of the molecular diagnostic assays such as polymerase chain reaction (PCR), enzyme digestion and other applications are influence by quantity and quality of the extracted DNA strongly. Furthermore, to choose suitable and optimal tissue for genomic experiments nevertheless consider quantity and quality of the extracted DNA, we need to consider the comfort of sample collecting, transporting costs, storing costs, safety of sampling and pre-processing<span dir="RTL">.</span> I this study an efficient salting out<span dir="RTL">-</span>modified procedure for extracting DNA from hair roots, introduced. This procedure yield high quantity of DNA with adequate quality. Four hundred Hair roots and blood samples were obtained from buffalo units experiment. The yield of extracted DNA and the purity of the DNA samples were evaluated by absorbance (A2260/A280) ratio. 1% agar gel electrophoresis and PCR amplification. Mean DNA yields and the 260/280 nm absorbance ratio for buffalo hair roots and blood were 27.67 μg and 1.85 and 17.86 μg and 1.83, respectively. Comparing this results with previous studies demonstrate that our modified procedure is cost-effectiveness, comfortable, safe, efficient and recommendable procedure to carry out in biotechnology laboratories.
استخراج DNA, واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR), استخراج نمکی
DNA extraction procedures, Polymerase chain reaction (PCR), Modified salting out
145
151
http://rap.sanru.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-231&slc_lang=fa&sid=1
مهدی
مخبر یوسف آباد
10031947532846007161
10031947532846007161
No
مصطفی
صادقی
10031947532846007162
10031947532846007162
Yes
محمد
مرادی شهربابک
10031947532846007163
10031947532846007163
No
حسین
مرادی شهر بابک
10031947532846007164
10031947532846007164
No
جواد
رحمانی
10031947532846007165
10031947532846007165
No
مهدیه
یوسفی دارستانی
10031947532846007166
10031947532846007166
No