fa بررسی تنوع ژنتیکی در ژن‌های خانواده DNMT در گاو‌های نژاد هلشتاین با تکنیک PCR-SSCP ژنتیک و اصلاح نژاد دام ژنتیک و اصلاح نژاد دام پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:11px;">ژن‌های خانواده <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNA</span></span> متیل<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>ترانسفراز (<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNMTs</span></span>) بواسطه نقش کلیدی در شکل‌گیری و ابقاء الگوهای اپی‌ژنتیکی، اهمیت بالایی در کنترل تکوین و رشد و نمو جنینی از مرحله لقاح تا دوران پس از تولد دارند. مطالعه حاضر به<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>منظور شناسایی جهش‌های بالقوه در اگزون 33 ژن <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNMT-1</span></span>، اینترون 4 ژن <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNMT-3a</span></span> و اینترون 3 ژن <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNMT-3b</span></span> &nbsp;و ارتباط آن‌ها با وزن تولد در گاو‌های نژاد هلشتاین صورت گرفت. خون گیری به<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>طور تصادفی از تعداد 60 رأس گاو هلشتاین دارای رکورد وزن تولد تا بلوغ از یک گاوداری صنعتی در استان کرمان انجام شد. استخراج نمونه‌های <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNA</span></span> با استفاده از روش فنل<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>کلروفرم انجام گرفت و جایگاه‌های هدف با استفاده از پرایمر‌های اختصاصی توسط واکنش‌های زنجیره‌ای پلیمراز (<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">PCR</span></span>) تکثیر شدند. به<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>منظور ردیابی چند‌شکلی در توالی‌های هدف از تکنیک چند‌شکلی ساختار فضایی رشته‌های منفرد (<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">SSCP</span></span>) و رنگ<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>آمیزی با نیترات<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>نقره استفاده شد. نتایج این مطالعه حاکی از عدم وقوع جهش در تمامی جایگاه‌های مورد مطالعه بود، بطوری که در تمام نمونه‌های مورد بررسی، بر اساس اندازه قطعه مورد بررسی، الگوی باندی یکسانی شناسائی شد. عدم شناسائی وجود چند‌شکلی در نواحی مورد بررسی، احتمالاً ممکن است به<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>دلایلی نظیر ناکارآمدی نسبی تکنیک <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">PCR-SSCP</span></span> در شناسائی جهش‌ها، کوچک<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>بودن اندازه نمونه‌های مورد بررسی، پیامدهای تصادفی ناشی از رانش ژنی و یا تاثیر انتخاب مصنوعی و یا طبیعی بر علیه وقوع جهش در نواحی مزبور باشد. بنابراین، نواحی ژنی مورد بررسی در این تحقیق&nbsp; به<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span>عنوان نشانگر مولکولی برای ارزیابی صفت وزن تولد در گاو‌های هلشتاین فاقد کارائی هستند.</span></div> <div style="text-align: justify;">Due to their roles in regulating embryonic growth and development &nbsp;members of DNA Methyltransferases (DNMTs) family have been shown to play fundamental parts in &nbsp;embryonic fertilization to postnatal life; through regulating the establishment and/or maintenance of specific epigenetic marks. The present study was conducted to identify potential reported mutations within the exon 33 of DNMT-1, introns 4 of DNMT-3a and introns 3 DNMT-3a genes and their relationship with birth weight in Iranian Holstein cows. A total of 60&nbsp;blood&nbsp;samples&nbsp;from&nbsp;Holstein&nbsp;dairy cattle with records of weight from birth to adult age were randomly collected from industrial dairy cattle farm located in Kerman province. Genomic DNA samples was extracted using&nbsp;Phenol-Chloroform&nbsp;method and target sequence was amplified with PCR using specific primers. Polymerase chain reaction-single&nbsp;stranded&nbsp;conformational&nbsp;polymorphism&nbsp;(PCR-SSCP)&nbsp;and silver nitrate staining methods was&nbsp;used&nbsp;for screening potential mutation in target sequences. According to results of this study, in all cases, no mutation in target sequence were identified as&nbsp;all&nbsp;samples&nbsp;had the same specific SSCP pattern with&nbsp;respect&nbsp;to&nbsp;their&nbsp;size. The lack of polymorphism may imply that these region may be attributable to a relative inefficiency of PCR-SSCP for mutation detection, small sample size, stochastic effects of genetic drift and/or conserved nature of these genes due to either natural or artificial selection. According to the results of this study, analyzed sequence may not be informative as molecular marker for birth weight in Holstein cattle.</div> تنوع ژنتیکی, DNMTs, گاو هلشتاین ایران, PCR-SSCP DNMTs, Genetic Variation, Iranian Holstein Cattles, PCR-SSCP 104 112 http://rap.sanru.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-616-1&slc_lang=fa&sid=1 Mehdi Vafaye Valleh مهدی وفای واله me.va84@gmail.com 100319475328460012268 100319475328460012268 Yes University of Zabol گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زابل، زابل، ایران Sajjad Shahdadi Sardo سجاد شهدادی ساردو saj69shahdadi@gmail.com 100319475328460012269 100319475328460012269 No University of Zabol ژنتیک و اصلاح دام، گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زابل، زابل، ایران