TY - JOUR T1 - Identification of Polymorphism in HSP70A1A Gene in Mehraban and Romanov Sheep Breeds using PCR-SSCP Technique TT - شناسایی چند شکلی های ژن HSP70A1A در گوسفندان نژاد مهربان و رومانف با تکنیک PCR-SSCP JF - rap JO - rap VL - 12 IS - 31 UR - http://rap.sanru.ac.ir/article-1-1156-fa.html Y1 - 2021 SP - 169 EP - 179 KW - Cold tolerance KW - HSP70A1A gene KW - Mehraban sheep KW - Polymorphism KW - Romanov sheep N2 - در اقلیم­ های مختلف، نقش مقاومت سلولی به استرس­های ناشی از تغییر دما از طریق خانواده­ای از پروتئین­ها که اصطلاحاً، پروتئین­های شوک گرمایی (HSP) نامیده می­شوند، ­کنترل می شود. در پژوهش حاضر، شناسایی چند شکلی­های تک نوکلئوتیدی موجود در مناطقی از ژن HSP70A1A در گوسفند بومی نژاد مهربان و گوسفند وارداتی نژاد رومانف به جهت ویژگی این نژادها به سازگاری در اقلیم ­های سردسیری، بررسی شدند. در مجموع، تعداد 141 حیوان شامل گوسفند نژاد مهربان (100 رأس) و گوسفند نژاد رومانف (41 رأس)، به طور تصادفی انتخاب و مراحل خونگیری و استخراج DNA طبق دستورالعمل­های متداول انجام شد. سپس، واکنش­ زنجیره­ای پلیمراز (PCR) جهت تکثیر اگزون ژن HSP70A1A (Oar_v4.0; Chr20, NC_019477.2) به اندازه 247 و 298 جفت باز انجام شد. همچنین، جهت تعیین چند شکلی نمونه ­ها از تکنیک PCR-SSCP و متعاقب آن، توالی یابی مبتنی بر سانگر استفاده شد. بر اساس نتایج SSCP، به طور مشابه در هر دو نژاد مهربان و رومانف تعداد 5 الگوی باندی مشاهده شد که قطعات تکثیر شده 247 و 298 جفت بازی به ترتیب دو و سه الگوی الکتروفوزی را دارا بودند. علاوه بر این، هیچ تفاوتی در فراوانی الگوهای مشاهده شده بین این دو نژاد گوسفند یافت نشد. همچنین، در این نژادها نتایج توالی یابی وجود تعداد 5 چند شکلی تک نوکلئوتیدی (SNP) شامل g.26562252C>A، g.26562261G>C، g.26562270T>C، g.26562273C>T و g.26562279C>T در قطعه 247 جفت بازی و تعداد سه چند شکلی تک نوکلئوتیدی شامل g.26561745T>C، g.26561784C>T و g.26561877G>A در قطعه 298 جفت بازی شناسایی نمود. در مجموع، نتایج نشان داد که، همه چند شکلی­ها به غیر ازg.26561745T>C و g.26561877G>A به طور معنی­داری خارج از تعادل هاردی واینبرگ هستند (05/0p<). به عنوان نتیجه­گیری نهایی، با توجه به نقش پروتئین­های شوک دمایی در مقاومت به استرس­های محیطی، شناسایی این چند شکلی­ها می تواند تاثیر بسزایی در درک مکانیسم سازگاری به تحمل دمایی در نژادهای گوسفندان بومی ایرانی داشته باشد. M3 10.52547/rap.12.31.169 ER -